Diferencia clave - Phusion vs Taq Polymerase
Las ADN polimerasas son enzimas ampliamente utilizadas en técnicas de biología molecular y también están presentes de forma natural en todos los organismos que experimentan la replicación del ADN. Son las enzimas polimerizantes clave que intervienen durante la replicación. La ADN polimerasa es capaz de añadir nucleótidos al extremo 3 'libre de la hebra de ADN provocando así la extensión de una nueva hebra. En la actualidad, debido a los desarrollos de la biología molecular en el diagnóstico de enfermedades y las aplicaciones industriales, es importante fabricar polimerasas que tengan varias propiedades beneficiosas. Esto aumenta la precisión del método y lo convierte en una técnica más rápida. La polimerasa Phusion y Taq son dos enzimas polimerasas termoestables producidas comercialmente que se utilizan en aplicaciones moleculares especiales. Phusion es una ADN polimerasa aislada de Pyrococcus furiosus y se utiliza principalmente en experimentos de clonación para aumentar la fidelidad. La ADN polimerasa Taq es la ADN polimerasa estándar utilizada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y está aislada de la bacteria termoestable; Thermus aquaticus. La diferencia clave entre las dos enzimas es el microorganismo fuente. La phusion se aísla del extremófilo, Pyrococcus furiosus, mientras que la polimerasa Taq se aísla del termófilo, Thermus aquaticus. La polimerasa Taq se aísla del termófilo Thermus aquaticus. La polimerasa Taq se aísla del termófilo Thermus aquaticus.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es Phusion
3. Qué es Taq Polymerase
4. Similitudes entre Phusion y Taq Polymerase
5. Comparación lado a lado - Phusion vs Taq Polymerase en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es Phusion?
La ADN polimerasa de Phusion es una nueva polimerasa que se fabrica mediante el aislamiento de la enzima de Pyrococcus furiosus, que es una arquea extremófila. Estos microbios residen en condiciones de temperaturas extremadamente altas, lo que hace que la polimerasa sea una polimerasa altamente estable al calor. La polimerasa de phusion se utiliza para obtener una fidelidad extrema sobre la polimerasa termoestable convencional; Taq polimerasa. La polimerasa Phusion es capaz de amplificar moldes largos de hasta 7,5 kb de ADN genómico. La capacidad de polimerización óptima de la polimerasa Phusion es de 72 0 C. Phusion también se utiliza en productos de clonación para secuenciación, análisis de expresión y análisis de mutaciones.
La ADN polimerasa Phusion tiene la actividad exonucleasa 3 '- 5'. Esto permite la corrección de pruebas de la hebra recién sintetizada después de la síntesis. Por tanto, los desajustes de nucleótidos se pueden reparar fácilmente. Por tanto, tiene una tasa de error menor. Las ventajas generales de la polimerasa Phusion son;
- Extrema fidelidad
- Alta velocidad y tiempo de extensión reducido
- Reacciones robustas y requiere una optimización mínima
- Alto rendimiento
Figura 01: Phusion
La principal desventaja de la polimerasa Phusion es que se inhibe en presencia de trifosfato de desoxiuridina (dUTP). Cuando los dUTP se acumulan en la mezcla de reacción, pueden inhibir las acciones de la polimerasa Phusion. Esto se evita tratando la mezcla de reacción con dUTPasa antes de agregar la enzima. En la actualidad, se utiliza una variante resistente a dUTP de la polimerasa Phusion conocida como Pfu Turbo en lugar de la polimerasa Phusion como remedio a este problema.
¿Qué es la polimerasa Taq?
La invención de la ADN polimerasa Taq ha revolucionado el campo de la biología molecular. Resolvió un problema importante en la amplificación del ADN. La ADN polimerasa Taq es una enzima polimerasa termoestable extraída y aislada de la bacteria termófila Thermus aquaticus. El descubrimiento de estas enzimas conduce al desarrollo de la PCR. Esta enzima ha permitido el uso de la reacción en cadena de la polimerasa en la amplificación del ADN en lugar de las laboriosas técnicas de clonación convencionales. La PCR se utiliza ahora en el diagnóstico molecular, campos agrícolas e industriales con muchas variaciones nuevas agregadas a la técnica.
Figura 02: Taq polimerasa
La ADN polimerasa Taq funciona en el rango de temperatura óptimo entre 72 0 C - 80 0 C. La ADN polimerasa Taq requiere un cofactor; magnesio para su función. La polimerasa Taq no tiene la capacidad de corrección de pruebas 3 '- 5', por lo tanto, la tasa de error de la ADN polimerasa Taq es alta en comparación con los tipos más nuevos de ADN polimerasa como la polimerasa Phusion, etc. Pero, la popularidad de la ADN polimerasa Taq sigue siendo la lo mismo en todo el mundo de la ciencia debido a la conveniencia y la flexibilidad de la enzima.
¿Cuáles son las similitudes entre la polimerasa Phusion y Taq?
- Tanto las enzimas polimerasas Phusion como Taq son enzimas polimerizadoras que son capaces de agregar nucleótidos al extremo libre 3 'de la cadena de ADN.
- Tanto las polimerasas Phusion como Taq requieren una secuencia de cebador para iniciar la polimerización.
- Tanto las polimerasas Phusion como Taq son termoestables.
- Tanto las polimerasas Phusion como Taq se utilizan en los mecanismos de PCR para amplificar el ADN.
- Al agregar la polimerasa a la mezcla de reacción, las polimerasas Phusion y Taq se agregan en último lugar para garantizar la eficacia de la enzima.
- Tanto las polimerasas Phusion como Taq se sintetizan comercialmente con fines experimentales de biología molecular.
- Tanto las polimerasas Phusion como Taq requieren un cofactor para completar su función.
¿Cuál es la diferencia entre Phusion y Taq Polymerase?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
Phusion vs Taq polimerasa |
|
| Phusion es una ADN polimerasa aislada de Pyrococcus furiosus y se utiliza principalmente en experimentos de clonación para aumentar la fidelidad. | La ADN polimerasa Taq es la ADN polimerasa estándar utilizada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y se aísla de la bacteria termoestable, Thermus aquaticus. |
| Organismo fuente | |
| Phusion se extrae de arqueas extremófilas - Pyrococcus furiosus. | Estas obras literarias abarcan desde el período de colonización hasta el período de descolonización. |
| Capacidad de corrección de pruebas | |
| La capacidad de lectura de pruebas de 3 '- 5' está presente en Phusion. | La capacidad de lectura de pruebas de 3 'a 5' está ausente en la polimerasa Taq. |
| Fidelidad | |
| La alta fidelidad está ahí con Phusion. | La polimerasa Taq muestra baja fidelidad. |
| Amplificación | |
| Phusion es capaz de amplificar largos fragmentos de ADN. | La polimerasa Taq es capaz de amplificar fragmentos de ADN mucho más cortos. |
| Envenenamiento por dUTP | |
| La acción de la phusion es inhibida por la acumulación de impares. | La polimerasa Taq no es inhibida por dUPT. |
Resumen - Phusion vs Taq polimerasa
Phusion y Taq DNA polimerasa son dos polimerasas termoestables que se utilizan en técnicas de PCR. Phusion es una polimerasa aislada del extremófilo, Pyrococcus furiosus, mientras que Taq se aísla de la bacteria termoestable Thermus aquaticus. El descubrimiento de la ADN polimerasa Taq conduce a la invención de la PCR. Phusion tiene muchas ventajas sobre Taq que han hecho de Phusion una mejor opción para producir ADN de alta fidelidad. Sin embargo, la polimerasa Taq todavía se usa como enzima polimerasa estándar en la PCR. Ésta es la diferencia entre la polimerasa Phusion y Taq.
