Diferencia clave: Taq polimerasa frente a ADN polimerasa
La ADN polimerasa es una enzima que crea ADN nuevo a partir de sus componentes básicos (nucleótidos). En procariotas y eucariotas se encuentran diferentes tipos de ADN polimerasas. La duplicación del ADN es factible debido a la presencia de estas enzimas especiales, y la información genética se transmite a la descendencia por la acción de las ADN polimerasas. La polimerasa Taq es un tipo especial de polimerasa de ADN que es termoestable y se usa ampliamente en la PCR. La polimerasa Taq se encuentra en bacterias termófilas y se purifica en la replicación del ADN in vitro. La diferencia clave entre la polimerasa Taq y la polimerasa de ADN es que la polimerasa de Taq puede soportar altas temperaturas sin desnaturalizarse, mientras que otras polimerasas de ADN se desnaturalizan a altas temperaturas (a temperaturas que degradan las proteínas).
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es la polimerasa Taq
3. Qué es la ADN polimerasa
4. Comparación lado a lado: Taq polimerasa frente a ADN polimerasa
5. Resumen
¿Qué es la polimerasa Taq?
La polimerasa Taq (ADN polimerasa Taq) es una enzima utilizada para sintetizar ADN in vitro mediante la técnica de PCR. Es producido por la bacteria termófila llamada Thermus aquaticus que vive en fuentes termales y respiraderos termales. La polimerasa Taq es una enzima termoestable que no se degrada a altas temperaturas. La polimerasa Taq se purificó por primera vez y se publicó en Chien et al. en 1976. La técnica de PCR se realiza con la ayuda de la polimerasa Taq debido a su capacidad para tolerar altas temperaturas y fluctuaciones de temperatura durante la PCR. La polimerasa Taq cataliza la síntesis de ADN cuando hay cebadores, nucleótidos y el ADN molde monocatenario. La enzima consta de un único polipéptido con un peso molecular de aproximadamente 94 kDa. La polimerasa Taq muestra su actividad óptima a 80 ° C y en un rango de pH de 7-8 con la presencia de iones de magnesio. Tiene actividad polimerasa y exonucleasa. La enzima está compuesta por una sola cadena polipeptídica y el gen de la polimerasa Taq contiene un alto contenido de G y C (67,9%).
La polimerasa termoestable Taq permite realizar PCR a altas temperaturas que aumentan la especificidad de los cebadores y reducen la producción de productos de PCR no deseados (dímeros de cebadores). La polimerasa Taq también elimina la necesidad de agregar nuevas enzimas a la reacción de PCR después de todos y cada uno de los ciclos de reacción de PCR debido a su capacidad para soportar altas temperaturas. El descubrimiento de la polimerasa Taq permitió que la PCR se realizara en un solo tubo cerrado en una máquina relativamente simple. Debido a estas propiedades de la polimerasa Taq, la PCR se convierte en una técnica de laboratorio popular que se realiza de forma rutinaria en muchos análisis de biología molecular relacionados con el análisis de ADN.
La polimerasa Taq se usa ampliamente en técnicas de biología molecular y existe la necesidad de producir polimerasa Taq a gran escala. Por lo tanto, utilizando la tecnología de ADN recombinante y la clonación de genes, el gen que codificaba la ADN polimerasa Taq se había clonado y expresado en Escherichia coli. Esto ha facilitado enormemente la producción de polimerasa Taq recombinante y ha reducido el precio de esta enzima para un uso adecuado.
Figura 1: Taq polimerasa
¿Qué es la ADN polimerasa?
La ADN polimerasa es una enzima que cataliza la síntesis de ADN a partir de nucleótidos. Es la enzima más precisa responsable de duplicar genomas y transmitir información genética a la descendencia. Durante la división celular, la ADN polimerasa duplica todo su ADN y pasa una copia a cada célula hija. En 1955, Arthur Kornberg descubrió la ADN polimerasa en E Coli. La función de la ADN polimerasa depende de varios requisitos; plantilla de ADN, iones Mg +2, los cuatro tipos de desoxinucleótidos (dATP, dTTP, dCTP yd GTP) y una secuencia corta de ARN (cebador). La síntesis del ADN se realiza en la dirección de 5 'a 3' mediante la ADN polimerasa.
Las ADN polimerasas se pueden agrupar en siete familias diferentes: A, B, C, D, X, Y y RT (transcriptasa inversa). Los retrovirus codifican RT; una ADN polimerasa inusual que necesita una plantilla de ARN para la síntesis de ADN. Hay cinco tipos diferentes de ADN polimerasas que se encuentran en los procariotas para diferentes roles en la replicación del ADN. La ADN polimerasa 3 es responsable de la polimerización de la nueva hebra de ADN. La ADN polimerasa 1 es responsable de reparar y parchear el ADN. Las ADN polimerasas 2, 4 y 5 son responsables de reparar y corregir el ADN. En eucariotas, hay 15 tipos distintos de ADN polimerasas. Incluyen cinco familias principales.
Figura 2: ADN polimerasa
Las ADN polimerasas se utilizan en la clonación de genes, PCR, secuenciación de ADN, detección de SNP, diagnóstico molecular, etc. La polimerasa Taq es un tipo de ADN polimerasa que puede tolerar altas temperaturas y estar disponible para la síntesis de ADN sin degradación.
¿Cuál es la diferencia entre la polimerasa Taq y la polimerasa de ADN?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
Taq polimerasa frente a ADN polimerasa |
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| La polimerasa de ADN Taq es una enzima que crea ADN. Es una enzima termoestable que se encuentra en los termófilos. | La ADN polimerasa es una enzima que facilita la replicación del ADN y se encuentra tanto en organismos procarióticos como eucarióticos. |
| Degradación a altas temperaturas | |
| La polimerasa Taq es activa a altas temperaturas. | Las ADN polimerasas se degradan a altas temperaturas desnaturalizantes de proteínas. |
| Utilizar | |
| Esto se usa ampliamente en PCR | La polimerasa Taq reemplazó a la polimerasa de ADN de coli originalmente utilizada en la PCR. |
Resumen - Taq polimerasa frente a ADN polimerasa
Las ADN polimerasas son las enzimas que sintetizan ADN a partir de desoxinucleótidos (componentes básicos del ADN) cuando la plantilla y los cebadores están disponibles. Se requieren ADN polimerasas para duplicar el ADN de las células y pasar a células hijas idénticas durante la división celular. Las ADN polimerasas agregan nuevos nucleótidos al extremo 3 'del cebador y alargan la síntesis de la nueva cadena de ADN en la dirección 5' a 3 '. La ADN polimerasa Taq es una de las enzimas ADN polimerasa que es muy útil en el método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de amplificación de ADN. La ADN polimerasa 1 de E. coli se usó antes para la PCR, pero la polimerasa Taq comercial la reemplazó debido a su alta especificidad de unión del cebador a temperaturas elevadas y la producción de un mayor rendimiento del producto deseado con menos producto de amplificación inespecífico. Esta es la diferencia entre Taq Polymerase y DNA Polymerase.
