Diferencia clave - YAC vs M13 Phage Vector
La clonación de ADN es un proceso importante que permite la propagación de importantes fragmentos de ADN de organismos. Requiere la unión de ADN específico con el ADN del vector para crear ADN recombinante que se transforma en el organismo huésped. Un vector es una molécula de ADN que se comporta como un vehículo para transportar material genético extraño a otra célula u organismo. Debería poder replicarse dentro del organismo huésped y producir múltiples copias de ADN recombinante. Hay diferentes tipos de vectores que se utilizan en la clonación de ADN. El cromosoma artificial de levadura (YAC) y el vector del fago M13 son dos tipos entre ellos. La diferencia clave entre el vector de fago YAC y M13 es que YAC es un cromosoma artificial que se replica en células de levadura, mientras que el vector de fago M13 es un ADN circular monocatenario del bacteriófago M13 que se replica en células de E. Coli.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es YAC
3. Qué es el vector de fagos M13
4. Comparación lado a lado - YAC vs vector de fagos M13
5. Resumen
¿Qué es un vector YAC?
YAC es un cromosoma construido artificialmente que tiene la capacidad de transportar un gran segmento de ADN extraño y replicarse dentro de las células de levadura. Tiene centrómero, telómero y secuencias de replicación autónoma esenciales para la replicación y estabilidad. YAC también debería llevar un marcador o marcadores selectivos y sitios de restricción para convertirlo en un vector de clonación eficaz. Se pueden insertar grandes secuencias que van desde 1000 kb a 2000 kb en YAC y transferirse a levadura.
Figura 01: Vector YAC
¿Qué es M13 Phage Vector?
El bacteriófago M13 es un virus que infecta y se replica en E. Coli. El genoma del bacteriófago M13 es de tamaño pequeño, alrededor de 6,7 kb. Es un ADN de sentido positivo, circular y monocatenario. Este virus infecta específicamente la bacteria E Coli a través de F pilus. Una vez que ingresa el ssDNA en la bacteria, sintetiza su hebra complementaria y se convierte en dsDNA o la forma replicativa (RF) de M13. La RF puede comportarse como un plásmido dentro del organismo huésped. El dsDNA se replica dentro de E. Coli y produce ssDNA con nuevos fagos. Estos nuevos fagos se liberan continuamente de la E Coli sin matar la célula huésped. Sin embargo, la infección ralentiza el crecimiento de E. Coli. El dsDNA puede extraerse de células bacterianas y usarse como vectores en la clonación de DNA. Se conocen como vectores de fagos M13. Pueden manipularse fácilmente y usarse de manera similar a los vectores plásmidos.
La capacidad inherente de infección de estos fagos M13 sirve como una buena calificación para su uso como vector en la clonación de genes. Al desarrollar M13 en un vector, se deben incorporar varios elementos en su genoma. Son, un gen para la proteína represora lac (lac I), la región proximal al operador del gen lac Z, un promotor lac y un sitio de clonación múltiple (polienlazador). Cuando se usa dsDNA de M13 como vectores, puede tratarse como un vector plásmido. Sin embargo, el uso de ssDNA M13 tiene ventajas en la secuenciación del ADN y la mutagénesis dirigida al sitio.
Dado que el vector del fago M13 tiene múltiples sitios de clonación en la región lacZ, los vectores recombinados pueden identificarse fácilmente mediante el cribado de colonias azul / blanco en placas de agar que contienen IPTG y X-Gal. Las placas azules producidas en las placas no contienen los fagos recombinados. Por lo tanto, los fagos con inserciones pueden seleccionarse con fines de clonación.
Figura 02: Bacteriófago M13
¿Cuál es la diferencia entre YAC y M13 Phage Vector?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
YAC vs vector de fagos M13 |
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| YAC es un cromosoma diseñado genéticamente que tiene la capacidad de transportar un gran segmento de ADN extraño y replicarse dentro de las células de levadura. | El vector de fago M13 es un vector viral desarrollado por el bacteriófago M13 que se usa para insertar ADN extraño en E. Coli. |
| Propósito | |
| Los YAC se diseñaron para clonar grandes fragmentos de ADN genómico en levadura. | Los vectores de fago M13 se utilizan para insertar ADN extraño en E. Coli. |
| Insertar longitud | |
| Los YAC pueden contener insertos genómicos del tamaño de una megabase (1000 kb - 2000 kb). | El tamaño de las inserciones es de aproximadamente 1.500 bps. |
| Construcción | |
| El ADN de YAC es difícil de purificar intacto y requiere una alta concentración para generar el sistema de vector YAC. | Ocurre a través de la cadena de electrones fotosintéticos cíclicos. |
| Estabilidad | |
| YAC es inestable. | Los fagos M13 se pueden extraer fácilmente. |
| Talla | |
| Las enzimas son moléculas más grandes. | Los fagos M13 son estables que YAC. |
Resumen - YAC vs M13 Phage Vector
YAC es un sistema de vector construido artificialmente que utiliza una región específica del cromosoma de levadura para insertar grandes segmentos de material genético en células de levadura. El vector de fago M13 es un sistema de vector derivado del bacteriófago M 13 que usa E. coli como organismo huésped. Esta es la principal diferencia entre YAC y M13 Phage Vector … Ambos son igualmente útiles en tecnología de ADN recombinante y clonación de genes.
