Diferencia clave: nitrocelulosa frente a membrana de nailon
La transferencia es una técnica importante para la detección de secuencias específicas de ADN, ARN y proteínas de sus mezclas en biología molecular. Se realiza mediante una membrana llamada blot. Existen diferentes técnicas de transferencia, como la transferencia del norte, del sur y del oeste. La selección de una membrana adecuada para el proceso de transferencia debe realizarse con cuidado para evitar uniones no específicas y detecciones incorrectas. La nitrocelulosa, el nailon y el PVDF son membranas de uso común en las técnicas de transferencia. Tienen diferentes características. La diferencia clave entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon es que las membranas de nitrocelulosa tienen un alto potencial de inmovilización de proteínas, mientras que las membranas de nailon tienen un alto potencial de inmovilización de ácidos nucleicos. Sin embargo, ambos tipos de membranas se utilizan con frecuencia en técnicas de transferencia.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es una membrana de nitrocelulosa
3. Qué es una membrana de nailon
4. Comparación lado a lado - Membrana de nitrocelulosa frente a nailon
5. Resumen
¿Qué es una membrana de nitrocelulosa?
La membrana de nitrocelulosa es un filtro de membrana comúnmente utilizado en técnicas de transferencia de ácidos nucleicos y proteínas. Tiene un alto potencial de unión a proteínas. Por tanto, las membranas de nitrocelulosa se utilizan ampliamente en la técnica de transferencia Western. Las membranas de nitrocelulosa son compatibles con todas las técnicas de hibridación y muestran capacidades superiores de unión sin interferencias. Las membranas de nitrocelulosa son naturalmente hidrofílicas por naturaleza. Hacen una interacción hidrófila con las moléculas y las inmovilizan eficazmente sobre la membrana. Las membranas comerciales de nitrocelulosa están disponibles en dos tamaños de poro: 0,45 y 0,2 µm.
Figura 01: Membrana de nitrocelulosa utilizada en Western Blot
¿Qué es una membrana de nailon?
La membrana de nailon es otro tipo de membrana comercial que se utiliza en técnicas de transferencia. Se usa alternativamente con membranas de nitrocelulosa para transferencia sur y norte. Las membranas de nailon son ideales para el Southern blot que la nitrocelulosa debido a su alta afinidad para unirse al ADN. Debido a varias características únicas de las membranas de nailon, los investigadores suelen utilizar membranas de nailon para la transferencia sur y norte en lugar de sobre la membrana de nitrocelulosa. Las membranas de nailon también se recomiendan para pelar y reprobar, a diferencia de la nitrocelulosa.
Figura 02: Membrana de nailon utilizada para el Southern Blot
¿Cuál es la diferencia entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
Nitrocelulosa vs Membrana de Nylon |
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| Las membranas de nitrocelulosa son frágiles. | Las membranas de nailon son menos frágiles. |
| Manejo | |
| Son difíciles de manejar. | Son fáciles de manejar. |
| Reproche | |
| Las membranas de nitrocelulosa sin soporte son difíciles de reprobar. | La reparación es fácil con membranas de nailon. |
| Compatibilidad con diversas condiciones de almacenamiento | |
| Las membranas de nitrocelulosa tienen menos resistencia para soportar diversas condiciones de almacenamiento. | Las membranas de nailon responden de forma más robusta a diversas condiciones de almacenamiento. |
| Utilizar | |
| Se requiere prehumedecimiento. | No se requiere prehumedecimiento para las membranas de nailon. |
| Naturaleza hidrofílica | |
| Las membranas de nitrocelulosa son de naturaleza hidrófila pero son menos hidrófilas que las membranas de nailon. | Son de naturaleza altamente hidrófila. |
| Potencial de inmovilización | |
| Las membranas de nitrocelulosa tienen menos afinidad por los ácidos nucleicos. Pero tiene una gran afinidad por las proteínas. | Las membranas de nailon tienen un alto potencial de unión con los ácidos nucleicos que las membranas de nitrocelulosa. |
Resumen - Nitrocelulosa vs Membrana de Nylon
Las membranas de nitrocelulosa y nailon son láminas especiales que se utilizan en la técnica de transferencia para reproducir el patrón de bandas en el gel. Permiten la posibilidad de detectar una secuencia específica o una proteína de las mezclas inmovilizándolas en la membrana. Una vez que las moléculas se inmovilizan en la membrana, se puede utilizar como sustrato para el análisis de hibridación con sondas marcadas. La membrana de nitrocelulosa se usa comúnmente para la detección de proteínas en la técnica de transferencia Western debido a su alta afinidad de unión con las proteínas. Las membranas de nailon se utilizan a menudo para la transferencia sur y norte. Ésta es la diferencia entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon.
