Diferencia clave: electroforesis en gel horizontal frente a vertical
La electroforesis en gel es una técnica de laboratorio utilizada en genética para separar mezclas que contienen ADN, ARN y otras proteínas de acuerdo con su respectiva carga y tamaño molecular. El ADN, el ARN o las proteínas que deben separarse en este método se pasan a través de un gel que contiene poros pequeños. Las moléculas son impulsadas a través del gel por un campo eléctrico. Las moléculas atraviesan los poros del gel y la velocidad del movimiento es inversamente proporcional a sus respectivas longitudes. Por tanto, las moléculas de menor tamaño molecular se moverán más rápido que las moléculas de mayor peso molecular. El campo eléctrico se genera por la diferencia de carga en dos extremos del gel. Un extremo contiene una carga positiva y el otro extremo contiene una carga negativa. Dado que las moléculas de ADN y ARN están cargadas negativamente,serán atraídos hacia el extremo cargado positivamente del gel. La electroforesis en gel puede ser de dos métodos diferentes: electroforesis en gel horizontal y electroforesis en gel vertical. En la electroforesis en gel horizontal, el gel está presente en una orientación horizontal y se sumerge en un tampón de funcionamiento continuo que está presente dentro de la propia caja de gel. En la electroforesis en gel vertical, el sistema tampón está orientado verticalmente y es discontinuo con dos cámaras presentes en la parte superior e inferior con un cátodo y un ánodo, respectivamente. Esta es la diferencia clave entre la electroforesis en gel horizontal y vertical.el gel está presente en una orientación horizontal y está sumergido en un tampón de funcionamiento continuo que está presente dentro de la propia caja de gel. En la electroforesis en gel vertical, el sistema tampón está orientado verticalmente y es discontinuo con dos cámaras presentes en la parte superior e inferior con un cátodo y un ánodo, respectivamente. Esta es la diferencia clave entre la electroforesis en gel horizontal y vertical.el gel está presente en una orientación horizontal y está sumergido en un tampón de funcionamiento continuo que está presente dentro de la propia caja de gel. En la electroforesis vertical en gel, el sistema tampón está orientado verticalmente y es discontinuo con dos cámaras presentes en la parte superior e inferior con un cátodo y un ánodo, respectivamente. Esta es la diferencia clave entre la electroforesis en gel horizontal y vertical.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es la electroforesis en gel horizontal
3. Qué es la electroforesis en gel vertical
4. Similitudes entre la electroforesis en gel horizontal y vertical
5. Comparación lado a lado: electroforesis en gel horizontal y vertical en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es la electroforesis horizontal en gel?
La electroforesis horizontal en gel utiliza la teoría básica para la separación de moléculas de ADN, ARN o proteínas de acuerdo con su respectivo tamaño molecular y carga. En esta técnica, el gel está presente en orientación horizontal y se sumerge en un tampón que es continuo. El gel de agarosa se utiliza para separar la caja de gel en dos compartimentos. Un extremo de la caja de gel contiene un ánodo mientras que el otro extremo contiene un cátodo. Cuando se aplica una corriente, el búfer utilizado en esta técnica permite la creación de un gradiente de carga. Cuando se aplica la carga, el gel tiende a calentarse. El búfer también funciona como refrigerante, que mantiene la temperatura en niveles óptimos. La recirculación del tampón de funcionamiento evita la formación de un gradiente de pH. No se puede utilizar un sistema de tampón discontinuo en electroforesis en gel horizontal, ya que los dos compartimentos del sistema de gel se conectan con el tampón de funcionamiento. La acrilamida se usa durante la electroforesis en gel para separar mezclas de proteínas.
Figura 01: Electroforesis en gel horizontal
En la electroforesis horizontal en gel, no se puede utilizar acrilamida ya que la caja de gel está expuesta al oxígeno. Debido a la presencia de oxígeno, se inhibe la polimerización de acrilamida y esto interfiere con la formación del gel. La electroforesis horizontal en gel es un método sencillo que se utiliza en la separación de ADN y ARN.
¿Qué es la electroforesis vertical en gel?
La técnica de electroforesis en gel vertical funciona de acuerdo con la teoría primaria de la electroforesis en gel, pero se considera más compleja que el método de electroforesis en gel horizontal. Esta técnica utiliza un búfer discontinuo. Un cátodo está ubicado en la cámara superior y el ánodo está ubicado en la cámara inferior. Los electrodos presentes en cada compartimento proporcionan el campo eléctrico requerido. Se vierte una fina capa de gel entre las dos placas de vidrio montadas. Por lo tanto, la parte superior del gel se sumerge en la cámara superior y la parte inferior del gel se sumerge en la cámara del fondo. Una vez que se aplica la corriente, una pequeña porción del tampón se mueve a la cámara inferior desde la cámara superior a través del gel. La corriente aplicada en esta técnica es de unidades diminutas.
Figura 02: Electroforesis en gel vertical
En la electroforesis vertical en gel, el tampón solo fluye a través del gel. Esto permite un control preciso del gradiente de voltaje durante la etapa de separación. Puede utilizarse gel de acrilamida ya que los compartimentos no están expuestos al oxígeno atmosférico. Debido al tamaño de poro más pequeño del gel de acrilamida, se puede lograr una separación precisa con una resolución más alta.
¿Cuáles son las similitudes entre la electroforesis en gel horizontal y vertical?
- Ambos sistemas funcionan según la teoría básica de la electroforesis en gel.
- El ánodo y el cátodo se utilizan para proporcionar el campo eléctrico requerido en ambos sistemas.
¿Cuál es la diferencia entre electroforesis en gel horizontal y vertical?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
Electroforesis en gel horizontal vs vertical |
|
| La electroforesis en gel horizontal es una técnica de electroforesis en gel en la que el gel está presente en una orientación horizontal. | La electroforesis en gel vertical es una técnica de electroforesis en gel en la que el gel se orienta verticalmente. |
| Buffer | |
| La electroforesis horizontal en gel consiste en un tampón continuo. | El tampón de funcionamiento es discontinuo en la electroforesis en gel vertical. |
| Uso de acrilamida | |
| La acrilamida no se puede utilizar para electroforesis en gel horizontal ya que la caja de gel está expuesta al oxígeno atmosférico. | Dado que el gel no está expuesto al oxígeno atmosférico debido a dos cámaras separadas, se podría utilizar acrilamida para la electroforesis vertical en gel. |
| Función | |
| La electroforesis horizontal en gel se usa más a menudo para la separación de mezclas de ADN y ARN, pero no de proteínas. | La electroforesis en gel vertical se utiliza para separar mezclas de proteínas. |
Resumen: electroforesis en gel horizontal vs vertical
La electroforesis en gel es una técnica de laboratorio que se usa ampliamente en la separación de mezclas que contienen moléculas de ADN, ARN y proteínas. Hay dos métodos de electroforesis en gel: electroforesis en gel horizontal y vertical. En la electroforesis en gel horizontal, el tampón de funcionamiento es continuo, mientras que en la electroforesis en gel vertical, es discontinuo. Esta es la diferencia entre la electroforesis en gel horizontal y vertical. Ambos sistemas funcionan según el principio común de electroforesis en gel.
Descargar la versión PDF de electroforesis en gel horizontal vs vertical
Puede descargar la versión PDF de este artículo y utilizarla para fines sin conexión según la nota de cita. Descargue la versión PDF aquí Diferencia entre electroforesis en gel horizontal y vertical.
