Diferencia clave: citometría de flujo frente a FACS
En el contexto de la teoría celular, las células son la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación de células es una metodología que se utiliza para separar diferentes células según las características fisiológicas y morfológicas. Pueden ser de características intracelulares o extracelulares. La interacción de ADN, ARN y proteínas se considera propiedades interactivas intracelulares, mientras que la forma, el tamaño y las diferentes proteínas de superficie se consideran propiedades extracelulares. En la ciencia moderna, las metodologías de clasificación celular han llevado a ayudar a las diferentes investigaciones en estudios biológicos y también al establecimiento de nuevos principios a través de la investigación en medicina. La clasificación de células se lleva a cabo en varias metodologías que incluyen tanto primitivas con menos equipo como metodologías tecnológicas avanzadas con el uso de maquinaria sofisticada. La citometría de flujo, la clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS), la selección de células magnéticas y la clasificación de células individuales son las principales metodologías utilizadas. La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. FACS es un tipo especializado de citometría de flujo. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de fluorescencia y dispersión de luz en dos o más contenedores. Esta es la diferencia clave entre la citometría de flujo y FACS.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es la citometría de flujo
3. Qué es FACS
4. Similitudes entre la citometría de flujo y FACS
5. Comparación lado a lado - Citometría de flujo vs FACS en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es la citometría de flujo?
La citometría de flujo es un método que se utiliza para examinar y determinar la expresión de moléculas intracelulares y la superficie celular y para definir y caracterizar distintos tipos de células. También se utiliza para determinar el volumen y el tamaño de las células y para evaluar la pureza de las subpoblaciones aisladas. Esto permite la evaluación de múltiples parámetros de celdas individuales aproximadamente al mismo tiempo. La citometría de flujo se utiliza para medir la intensidad de la fluorescencia que se produce debido a los anticuerpos marcados con fluorescencia que ayudan a identificar proteínas o ligandos que se unen a las células asociadas.
Figura 01: Citometría de flujo
Generalmente, la citometría de flujo incluye principalmente tres subsistemas. Son la fluídica, la electrónica y la óptica. En citometría de flujo, se encuentran disponibles cinco componentes principales que se utilizan en la clasificación de células. Son, una celda de flujo (una corriente de líquido que se usa para transportarlos y alinear las celdas para el proceso de detección óptica), un sistema de medición (puede ser de diferentes sistemas incluyendo, lámparas de mercurio y xenón, de alta potencia refrigeradas por agua o láseres de diodo o láseres de baja potencia refrigerados por aire), un ADC; Sistema convertidor analógico a digital, sistema de amplificación y una computadora para análisis. La adquisición es el proceso mediante el cual se recopilan los datos de las muestras utilizando un citómetro de flujo. Este proceso está mediado por una computadora que está conectada con el citómetro de flujo. El software presente en la computadora analiza la información enviada a la computadora desde el citómetro de flujo. El software también tiene la capacidad de ajustar los parámetros del experimento controlando el citómetro de flujo.
¿Qué es FACS?
En el contexto de la citometría de flujo, la clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) es un método que se utiliza para diferenciar y clasificar una muestra de una mezcla de células biológicas. Las celdas están separadas de dos o más contenedores. El método de clasificación se basa en las características físicas de la célula, que incluyen las características de dispersión de luz y fluorescencia de la célula. Ésta es una técnica científica importante, que puede utilizarse para obtener resultados cuantitativos y cualitativos fiables de las señales de fluorescencia que se emiten desde cada célula. Durante FACS, inicialmente, la mezcla de células obtenida previamente; se dirige una suspensión al centro de una estrecha corriente de líquido que fluye rápidamente. El flujo de líquido está diseñado para separar las células de la suspensión en función del diámetro de cada célula. Se aplica un mecanismo de vibración a la corriente de suspensión que da como resultado la formación de gotitas individuales.
Figura 02: FACS
El sistema está calibrado para crear una sola gota con una celda. Justo antes de la formación de gotitas, la suspensión de flujo se mueve a lo largo de un aparato de medición de fluorescencia que detecta la característica de fluorescencia de cada célula. En el punto de formación de las gotas, se coloca un anillo de carga eléctrica que induce una carga en el anillo antes de medir la intensidad de la fluorescencia. Una vez que las gotitas se forman a partir de la corriente de suspensión, se atrapa una carga dentro de las gotitas que luego entra en un sistema de desviación electrostática. Según la carga, el sistema desvía las gotas a diferentes contenedores. El método de aplicación del cargo varía según los diferentes sistemas utilizados en FACS. El equipo utilizado en FACS se conoce como clasificador de células activado por fluorescencia.
¿Cuál es la similitud entre la citometría de flujo y FACS?
La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas
¿Cuál es la diferencia entre citometría de flujo y FACS?
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Citometría de flujo vs FACS |
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| La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. | FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de fluorescencia y dispersión de luz en dos o más contenedores. |
Resumen: citometría de flujo frente a FACS
La célula es la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es el proceso mediante el cual las células se aíslan y diferencian en diferentes categorías según sus propiedades intracelulares y extracelulares. La citometría de flujo y FACS son dos metodologías importantes en la clasificación celular. Ambos procesos están desarrollados para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de fluorescencia y dispersión de luz en dos o más contenedores. Ésta es la diferencia entre la citometría de flujo y la FACS.
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