Diferencia clave: tinción de Gram frente a ácido rápido
Las bacterias son microorganismos muy pequeños. Son transparentes y su detección es difícil en condiciones de vida y sin teñir. Por tanto, se desarrollan varios métodos de tinción para facilitar la detección bacteriana. Hay tres tipos principales de técnicas de tinción: tinción simple, tinción diferencial y tinción estructural. La tinción diferencial es una técnica que utiliza más de una tinción para diferenciar las bacterias. La tinción de Gram y la tinción ácido-resistente se conocen más popularmente como tinciones diferenciales. La tinción de Gram es una técnica de tinción diferencial, que separa las bacterias en dos grupos conocidos como bacterias Gram-positivas y bacterias Gram-negativas. La tinción acidorresistente es una tinción diferencial utilizada para identificar organismos acidorresistentes como Mycobacterium de organismos no acidorresistentes. Esta es la diferencia clave entre la tinción de Gram y la tinción Acid Fast.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia clave
2. Qué es la tinción de Gram
3. Qué es el ácido rápido
4. Similitudes entre la tinción de Gram y el ácido rápido
5. Comparación lado a lado: tinción de Gram frente a ácido acido en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es la tinción de Gram?
La tinción de Gram es una importante técnica de tinción diferencial utilizada para la identificación bacteriana en microbiología. Esta técnica fue introducida por el bacteriólogo danés Hans Christian Gram en 1884. La tinción de Gram clasifica las bacterias en dos grupos principales llamados gram positivos y gram negativos, que son muy importantes en la clasificación e identificación bacteriana. Los microbiólogos realizan la tinción de Gram como un paso inicial en la caracterización bacteriana durante sus estudios.
Las bacterias se agrupan según las diferencias en su pared celular. Las bacterias gram positivas se componen de una capa gruesa de peptidoglicano en su pared celular, mientras que las bacterias gram negativas se componen de una capa delgada de peptidoglicano en su pared celular. El resultado de la tinción de Gram se basará en la diferencia en el grosor de la capa de peptidoglicano de la pared celular.
La tinción de Grams se realiza utilizando cuatro reactivos diferentes, a saber; tinte primario, mordiente, decolorante y contra tinte. El violeta cristal y la safranina se utilizan como tinciones primarias y contrarias, respectivamente, mientras que se utilizan gramos de yodo y alcohol al 95% como mordiente y decolorante, respectivamente. Los pasos básicos de la tinción de gramos son los siguientes;
- Se prepara un frotis bacteriano en un portaobjetos de vidrio limpio, se fija con calor y se enfría.
- El frotis se inunda con violeta cristal durante 1 a 2 minutos.
- El frotis se enjuaga con agua corriente lenta para eliminar el exceso de manchas.
- Se aplican gramos de yodo al frotis durante 1 minuto.
- El frotis se enjuaga con agua corriente lenta
- El frotis se lava con alcohol al 95% durante 2 a 5 segundos y se enjuaga con agua corriente lenta.
- El frotis se contratiñe con safranina durante 1 minuto
- El frotis se enjuaga con agua corriente lenta, se seca y se observa al microscopio.
Al final de la tinción de Gram, las bacterias gram negativas se observarán en color rosa mientras que las bacterias gram positivas se observarán en color púrpura.
Figura 01: Bacterias Gram negativas y Gram positivas
El resultado de la tinción de gramos se decide por el grosor de la capa de peptidoglicano en su pared celular. Durante el paso de decoloración, el tinte primario y el mordiente se eliminan fácilmente de las bacterias gramnegativas y se vuelven incoloros ya que tienen una fina capa de peptidoglicano. La tinción primaria se retiene en las bacterias gram positivas ya que tienen una capa gruesa de peptidoglicano. La contratinción no será efectiva para bacterias gram positivas debido a la retención de la mancha primaria. Por lo tanto, los gramos de bacterias positivas serán visibles en el color de la mancha primaria, es decir, de color púrpura. La contratinción manchará las bacterias gramnegativas y serán visibles en el color de la púa, que es el color de la safranina. Por lo tanto, es fácil clasificar las bacterias en dos grupos mediante tinción de Gram y es valiosa en la diferenciación e identificación bacterianas.
¿Qué es el ayuno ácido?
La solidez a los ácidos es una propiedad física de ciertas bacterias, específicamente su resistencia a la decoloración por ácidos durante los procedimientos de tinción. Una vez teñidos, estos organismos resisten los procedimientos de decoloración basados en ácido diluido o etanol, comunes en muchos protocolos de tinción. Por lo tanto, se les da el nombre de "ácido resistente" a esos organismos. Esta propiedad se demuestra por tener un alto nivel de material ceroso (ácidos micólicos) en sus paredes celulares. Esta prueba es fundamental para la identificación de Mycobacterium tuberculosis.
Figura 2: Micobacterias acidorresistentes
Esta tinción ácido-resistente fue desarrollada por Paul Ehrlich en 1882. La técnica ácido-resistente de Ehrlich fue modificada por Ziehl-Neelsen y ahora se usa con más frecuencia. El procedimiento de tinción ácido-rápido implica tres reactivos diferentes. Carbol fuschin se utiliza como tinte principal. El alcohol ácido se utiliza como agente decolorante. El azul de metileno se utiliza como contratinción. El procedimiento de tinción se realiza de la siguiente manera.
- La tinción primaria (carbol fucsina) se aplica a la muestra fijada en el portaobjetos (todas las células se tiñerán de color rojo).
- El portaobjetos se calienta al vapor durante 5 minutos, lo que lleva las manchas a las células correctamente.
- Luego se agrega la solución decolorante (esto elimina el tinte rojo de todas las células excepto las bacterias ácido-resistentes).
- Se agrega azul de metileno como contratinción (colorea todas las células bacterianas decoloradas).
- Las bacterias resistentes a los ácidos permanecen rojas, mientras que las bacterias resistentes a los ácidos no se tiñen de azul.
¿Cuáles son las similitudes entre la tinción de Gram y el ayuno ácido?
- La tinción de Gram y Acid fast son dos técnicas de tinción diferencial.
- Ambas técnicas clasifican a las bacterias en dos grupos.
- Ambas técnicas utilizan dos tintes y uno decolorante.
¿Cuál es la diferencia entre la tinción de Gram y el ayuno ácido?
Diferencia del medio del artículo antes de la mesa
Tinción de Gram frente a ácido rápido |
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| La tinción de Gram es una técnica de tinción diferencial que separa las bacterias en dos grupos de bacterias Gram positivas y Gram negativas. | La tinción acidorresistente es una tinción diferencial que se utiliza para identificar organismos acidorresistentes de organismos no acidorresistentes. |
| Mancha primaria | |
| El violeta cristal es el tinte primario comúnmente utilizado en la tinción de Gram. | Carbol fucsina es el tinte principal utilizado en ácido resistente. |
| Agente decolorante | |
| El alcohol al 95% se utiliza como agente decolorante en la tinción de Gram. | El alcohol ácido se utiliza como agente decolorante en ácido acidorresistente. |
| Contador de manchas | |
| La tinción de Gram utiliza safranina como contratinción. | La tinción resistente al ácido utiliza azul de metileno como contratinción. |
| Observación | |
| Las bacterias Gram negativas se observan en color de pico y las bacterias Gram positivas se observan en color púrpura. | Las bacterias ácido resistentes se observan en color rojo y las bacterias no ácido resistentes se observan en color azul. |
Resumen: tinción de Gram frente a ayuno ácido
La visualización de microorganismos en estado vivo es difícil. Por lo tanto, las tinciones biológicas y los procedimientos de tinción se utilizan ampliamente para estudiar sus propiedades. La tinción diferencial es un tipo de técnica de tinción utilizada para diferenciar bacterias. La tinción de Gram y la tinción ácido-resistente son dos técnicas de tinción diferencial. La tinción de Gram diferencia las bacterias gram negativas y las bacterias gram positivas según el grosor de sus paredes celulares. La tinción acidorresistente diferencia las bacterias acidorresistentes de las no acidorresistentes en función del contenido de ácido micólico en la pared celular. Ésta es la diferencia entre acidorresistente y tinción de Gram.
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